在蚓激酶制劑的研發(fā)與生產(chǎn)過(guò)程中，針對蚓激酶對溫度和pH敏感的特性，國內某上市公司創(chuàng )新性地引入歐世盛全自動(dòng)在線(xiàn)紫外檢測系統，建立了實(shí)時(shí)在線(xiàn)的質(zhì)量控制方案。

01背景

地龍蚓激酶是從傳統中藥地龍（蚯蚓）中提取制備的蛋白水解酶制劑，其主要活性成分為具有纖溶作用的蚓激酶（Lumbrukinase），是從特種蚯蚓中提取的一組蛋白水解酶（酸性蛋白質(zhì)），分子量為 16–45 kDa。該酶制劑通過(guò)選擇性降解纖維蛋白原和纖維蛋白，發(fā)揮抗血栓、改善微循環(huán)等藥理作用。

蚓激酶對溫度和pH較為敏感，在提取和純化過(guò)程中，若溫度過(guò)高或pH值不合適，會(huì )導致蚓激酶活性降低甚至失活。傳統手動(dòng)取樣送檢成本較高，對操作人員的技術(shù)水平要求高，產(chǎn)品批次穩定性差，人員和時(shí)間投入大。

02應用案例

某上市公司在蚓激酶柱層析提取檢測中采用了歐世盛全自動(dòng)在線(xiàn)紫外檢測系統，紫外吸光度值變化實(shí)時(shí)在線(xiàn)監測，根據工藝和質(zhì)量標準對紫外吸光度值的要求，自動(dòng)切換不同洗脫液、提取液，實(shí)現蚓激酶提取過(guò)程的連續化和自動(dòng)化。

? 檢測過(guò)程

收集液首先收集到收集瓶中，通過(guò)蠕動(dòng)泵將收集瓶中的液體再輸送至原收集管道中，當檢測到液位下限，啟動(dòng)蠕動(dòng)泵，當液位下限檢測器檢測不到液體時(shí)，停止蠕動(dòng)泵工作（蠕動(dòng)泵流速≥出液流速）。上限液位傳感器作為報警傳感器，當上限液位傳感器檢測到液體時(shí)，蠕動(dòng)泵流速加大1 倍，當持續某個(gè)時(shí)間后，上限液位傳感器仍能檢測到液體，則發(fā)出報警信號，同時(shí)關(guān)閉入口及出口閥。

? 系統控制

系統包括在線(xiàn)紫外檢測單元、控制單元、洗脫液控制開(kāi)關(guān)、提取液控制開(kāi)關(guān)、取樣液控制開(kāi)關(guān)、清洗開(kāi)關(guān)等。通過(guò)紫外檢測單元持續獲得提取液的吸光度，進(jìn)而基于吸光度對洗脫液控制開(kāi)關(guān)進(jìn)行控制，以實(shí)現洗脫液的切換，并根據在切換洗脫液之后獲得的吸光度，對提取液控制開(kāi)關(guān)進(jìn)行控制，以收集到目標提取液體。在停止收集目標提取液體的情況下，控制清洗開(kāi)關(guān)打開(kāi)，以使清洗液經(jīng)清洗液管道流入紫外檢測單元對紫外檢測單元進(jìn)行清洗。

? 實(shí)現目標

一個(gè)在線(xiàn)紫外取樣檢測器實(shí)現兩根提取柱的取樣檢測并能自動(dòng)控制其洗脫液切換、提取液收集與排污切換，極大提高生產(chǎn)效率。

? 在線(xiàn)紫外檢測器與島津離線(xiàn)紫外檢測數據對比

大量現場(chǎng)吸光度測試數據從下圖對比可以看出，在線(xiàn)紫外數據測試穩定可靠，偏差??；且在高吸光度值時(shí)無(wú)需稀釋直接檢測。

島津離線(xiàn)紫外檢測一般步驟：

1.聯(lián)機進(jìn)入測量掃描界面。

2.根據實(shí)驗要求，設置檢測參數。

3.在樣品室內參比及檢測光路同時(shí)放入裝有空白溶液的比色皿。

4. 點(diǎn)擊“基線(xiàn)測量"以扣除空白的背景吸收。

5. 人工取樣送至理化分析室，裝入比色皿（高濃度稀釋?zhuān)?，將檢測光路中的空白溶液換成待測樣品，點(diǎn)擊“掃描"完成樣品掃描檢測。

6. 將比色皿中的溶液倒盡，然后用蒸餾水或有機溶劑沖洗比色皿至干凈，倒立晾干放回樣品室內。

歐世盛在線(xiàn)紫外檢測一般步驟：

1.開(kāi)機初始化，設備預熱。

2.切換閥自動(dòng)切換到清洗位，自動(dòng)沖洗，自動(dòng)校零。

3.樣品液泵入比色皿，實(shí)時(shí)顯示吸光度數值。

4. 廢液通過(guò)廢液蠕動(dòng)泵輸送到原裝置廢液管中。

5.測量結束切換閥調至清洗位，自動(dòng)沖洗。

? 核心優(yōu)勢對比

03總結

全自動(dòng)在線(xiàn)紫外檢測系統的核心優(yōu)勢在于將實(shí)驗室能力“現場(chǎng)化"：通過(guò)免試劑、全自動(dòng)、秒級響應的設計，解決了離線(xiàn)方法在實(shí)時(shí)性、人力成本和環(huán)境風(fēng)險上的瓶頸，尤其適用于需要高頻監測的場(chǎng)景。